https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36140
Tipo: | Tese |
Título: | DESENVOLVIMENTO DE UM HIPOALÉRGENO MULTICOMPONENTE DE EPÍTOPOS DE CÉLULAS T DOS ALERGENOS Der p 1, Der p 2 e Der p 23 E SEU USO POTENCIAL NO TRATAMENTO DA ALERGIA AO ÁCARO Dermatophagoides pteronyssinu |
Autor(es): | Fernandes, Antônio Márcio Santana |
Primeiro Orientador: | Pinheiro, Carina da Silva |
metadata.dc.contributor.advisor-co1: | Alcântara Neves, Neuza Maria |
metadata.dc.contributor.referee1: | de Almeida, Leonardo Augusto |
metadata.dc.contributor.referee2: | Marchioro, Silvana Beutinger |
metadata.dc.contributor.referee3: | Cardoso, Luciana Santos |
metadata.dc.contributor.referee4: | Pinheiro, Carina da Silva |
metadata.dc.contributor.referee5: | Portela, Ricardo Wagner Dias |
Resumo: | Introdução: A exposição a ácaros da poeira doméstica, como o Dermatophagoides pteronyssinus, desencadeia reações que estimulam e induzem a fisiopatologia da asma alérgica. A imunoterapia alérgeno-específica (AIT) é o único tratamento capaz de induzir tolerância a alérgenos e a única alternativa ao tratamento farmacológico atual, o qual apresenta diversos efeitos colaterais. Apesar de alguns protocolos da AIT serem realizados usando extratos brutos, trazendo algumas limitações, novas abordagens visam a construção de hipoalérgenos híbridos de epítopos de células T. Essas construções podem ser produzidas de forma a aumentar a imunogenicidade, reduzindo o número de moléculas que precisam ser produzidas para serem incluídas em uma formulação vacinal. Objetivo: Produzir uma proteína híbrida hipoalergênica baseada em epítopos de células T dos principais alérgenos do ácaro D. pteronyssinus para uso em imunoterapia em doenças alérgicas causadas por este ácaro. Métodos: O hipoalérgeno híbrido rDer p 2231, engenheirado utilizando epítopos de células T dos alérgenos Der p 1, Der p 2 e Der p 23 e purificado por cromatografia de afinidade, teve sua reatividade à IgE humana verificada em comparação aos alérgenos parentais. Um total de 18 citocinas foram avaliadas no sobrenadante de PBMCs (Peripheral blood mononuclear cells) de indivíduos atópicos e não atópicos, estimulados com rDer p 2231. O potencial terapêutico do híbrido rDer p 2231 também foi avaliado através de modelos murinos agudos e crônicos de alergia ao ácaro D. pteronyssinus. Resultados: PBMCs isolados de pacientes atópicos e esplenócitos de camundongos, quando estimulados com rDer p 2231, produziram níveis mais elevados de citocinas de perfil Th1 e citocinas reguladoras, enquanto reduziram citocinas Th2. O uso de rDer p 2231 como vacina terapêutica levou à redução da produção de IgE e menor atividade da peroxidase eosinofílica nas vias aéreas de camundongos alérgicos a D. pteronyssinus. O hipoalérgeno também atuou terapeuticamente no modelo crônico de alergia, reduzindo significativamente a hipertrofia da musculatura lisa, diminuição da fibrose da membrana sub-basal, hiperplasia de células caliciformes e resposta inflamatória alérgica. Conclusão: rDer p 2231 é uma molécula híbrida multicomponente com potencial para ser utilizada em AIT em pacientes co-sensibilizados aos principais alérgenos de D. pteronyssinus, uma vez que foi capaz de reduzir a produção de IgE, induzindo anticorpos bloqueadores alérgeno-específicos, restaurando e equilibrando as respostas Th1/Th2 e levando à indução de células T reguladoras, além de reduzir os efeitos patológicos teciduais associados à asma crônica. |
Abstract: | Introduction: Exposure to house dust mites, such as Dermatophagoides pteronyssinus, triggers reactions that stimulate and induce the pathophysiology of allergic diseases, such as asthma. Allergen-specific immunotherapy (AIT) is the only treatment capable of inducing tolerance to allergens and the only alternative to current pharmacological treatment, which has adverse effects. Although some AIT protocols are performed using crude extracts, bringing some limitations, new approaches such as the hybrid hypoallergens of T cell epitopes brought innovation in the area. These constructs increase immunogenicity and improve production scale, since only one vaccine formulation will be need. Objective: To produce a hypoallergenic hybrid protein based on T-cells epitopes of the main allergens of the dust mite Dermatophagoides pteronyssinus for use in immunotherapy in allergic diseases caused by this mite. Methods: The rDer p 2231 hybrid hypoallergen, engineered using T cell epitopes from Der p 1, Der p 2 and Der p 23 allergens and purified by affinity chromatography, had its reactivity to human IgE verified in comparison to parental allergens. A total of 18 cytokines were evaluated in the supernatant of PBMCs from atopic and non-atopic individuals, stimulated with rDer p 2231. The therapeutic potential of the hybrid rDer p 2231 was also evaluated through acute and chronic murine models of D. pteronyssinus mite allergy. Results: PBMCs isolated from atopic patients and splenocytes from mice, when stimulated with rDer p 2231, produced higher levels of Th1 profile cytokines and regulatory cytokines, while reducing Th2 cytokines. The use of rDer p 2231 as a therapeutic vaccine led to reduced IgE production and lower eosinophilic peroxidase activity in the airways of mice allergic to D. pteronyssinus. The hypoallergen also acted therapeutically in the chronic model of allergy, significantly reducing smooth muscle hypertrophy, decreased subbasal membrane fibrosis, goblet cell hyperplasia and allergic inflammatory response. Conclusion: rDer p 2231 is a multicomponent hybrid molecule with potential to be used in AIT in patients co-sensitized to major D. pteronyssinus allergens, since it was able to reduce IgE production, inducing allergen-specific blocking antibodies, restoring and balancing Th1/Th2 responses and leading to the induction of regulatory T cells, in addition to reducing the tissue pathological effects associated with chronic asthma. |
Palavras-chave: | Ácaros da poeira doméstica hipoalérgenos imunogenicidade proteína quimérica candidato vacinal munoterapia alérgeno-específic |
CNPq: | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE |
Idioma: | por |
País: | Brasil |
Editora / Evento / Instituição: | Universidade Federal da Bahia |
Sigla da Instituição: | UFBA |
metadata.dc.publisher.department: | Instituto de Ciências da Saúde - ICS |
metadata.dc.publisher.program: | Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (PPGBiotec) |
URI: | https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36140 |
Data do documento: | 7-Jul-2022 |
Aparece nas coleções: | Tese (PPGBiotec) |
Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
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